EM菌に含まれる微生物の解析ー細菌類ー
※糖蜜培地は、対照実験(ブランク:EM1添加なし)です。
【EM1活性液の微生物解析】
Part1 細菌のメタ16SrRNA解析結果
(V3-V4領域アンプリコンシーケンス)
[イルミナ社:NGSの新たな利用法 16S rRNAメタゲノム解析のポイント プロトコールのご紹介 より]
・プライマー結合位置
・プライマー配列
V3-V4_F:
TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAGCCTACGGGNGGCWGCAG
V3-V4_R:
GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAGGGACTACHVGGGTWTCTAAT
※「N」はA,C,G,Tの混合
「W」はA,Tの混合
「H」はA,T,Cの混合
「V」はA,C,Gの混合
・PCR条件
DNAポリメラーゼ:KAPA HiFi HotStart ReadyMix
(解析委託業者の報告レポートより)
NGS解析には各左端のレーンのPCR産物を使用した。
・NGS解析
PhiX:25%添加
(ライブラリーの配列の偏りを緩和するためにPhiXを添加)
シーケンサー:MiSeq(イルミナ社)
・解析パイプライン
QIIME:詳細なパラメータ設定は省略
【解析結果】
※存在比率の数字:
赤色=EM1添加で顕著に増えた細菌
茶色=糖蜜培地と共通(糖蜜由来)
緑= EM1添加で顕著に減った糖蜜由来の細菌
【EM1活性液中の細菌リスト】上位20
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【糖蜜培地中の細菌リスト】(上位20)
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【EM1活性液で増えた細菌リスト】上位10
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【EM1活性液で減った細菌リスト】上位10
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【解析費用】