EM菌に含まれる微生物の解析ー細菌類ー

※糖蜜培地は、対照実験(ブランク:EM1添加なし)です。 

 

【EM1活性液の微生物解析】

 Part1 細菌のメタ16SrRNA解析結果

(V3-V4領域アンプリコンシーケンス)

 

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[イルミナ社:NGSの新たな利用法 16S rRNAメタゲノム解析のポイント プロトコールのご紹介 より]

 

・プライマー結合位置

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・プライマー配列

V3-V4_F:

TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAGCCTACGGGNGGCWGCAG

V3-V4_R:

GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAGGGACTACHVGGGTWTCTAAT

 

※「N」はA,C,G,Tの混合

 「W」はA,Tの混合

 「H」はA,T,Cの混合

 「V」はA,C,Gの混合

 

・PCR条件

DNAポリメラーゼ:KAPA HiFi HotStart ReadyMix

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(解析委託業者の報告レポートより) 

NGS解析には各左端のレーンのPCR産物を使用した。

 

・NGS解析

PhiX:25%添加

(ライブラリーの配列の偏りを緩和するためにPhiXを添加)

シーケンサー:MiSeq(イルミナ社)

 

・解析パイプライン

QIIME:詳細なパラメータ設定は省略

 

【解析結果】

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※存在比率の数字:

赤色=EM1添加で顕著に増えた細菌

茶色=糖蜜培地と共通(糖蜜由来)

= EM1添加で顕著に減った糖蜜由来の細菌

 

【EM1活性液中の細菌リスト】上位20 

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【糖蜜培地中の細菌リスト】(上位20)

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【EM1活性液で増えた細菌リスト】上位10 

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【EM1活性液で減った細菌リスト】上位10

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【解析費用】

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